《浪客剑心:京都大火》讲述了明治维新的背景下,随着新政府逐步稳定,日本却暗藏不安的气息。恶德实业家武田观柳(香川照之 饰)操控女医师高荷惠(苍井优 饰)研制新型鸦片,招募堕落武士,并大肆收购周边土地,逐步实现其恶行计划。与此同时,以“拔刀斋”之名滥杀无辜的鹈堂刃卫(吉川晃司 饰)引起了前新选组头目斋藤一(江口洋介 饰)的关注,迫使隐姓埋名的绯村剑心(佐藤健 饰)重出江湖。虽然剑心渐渐在神谷道场的生活中找到了宁静,但武田观柳的贪婪欲望让人无法忽视,为了保护无辜之人,剑心决定再次拔刀,与相乐佐之助(青木崇高 饰)一起勇闯虎穴,展开一场惊心动魄的对决。